@MASTERSTHESIS{ 2023:247349757,
 	title = {Regulação de genes da família PPAR por epigenética: contribuição à cuidados com a saúde em câncer de cabeça e pescoço},
 	year = {2023},
 	url = "http://bdtd.famerp.br/handle/tede/836",
 	abstract = "Objetivos: Avaliar a regulação de genes da família PPAR em câncer de cabeça e pescoço 
 (CCP) por meio de mecanimo epigenético. Métodos: Foram cultivadas células de CCP da 
 cavidade oral (HN13) e hipofaringe (FaDu). Os ensaios de transfecção com os mimics (miR 9-5p, miR-17-5p e miR-21-5p, controle positivo e negativo) foram realizados em placas de 24 
 poços por 48h, contendo cerca de 80.000 células/poço, utilizando 100µL de meio Opti-MEN 
 (Invitrogen), 500µL de meio DMEM com 1µL de LipofectaminaTM RNAiMAX Tranfection 
 Reagent (Invitrogen) e 10mM de mimético para cada miRNA. Após a transfecção, extraiu-se 
 o RNA total com Tryzol (Applied Biosystems) e proteína com RIPA. A análise de expressão 
 gênica foi realizada pelo método quantitativo de reação de cadeia da polimerase (qPCR) para 
 o PPARα e PPARᵧ TaqmanTM (Thermo Fisher Scientific) e GAPDH (Thermo Fisher 
 Scientific) como gene referência, comparando ambos em relação ao controle negativo 
 (RQ=1). Como método para análise da expressão proteica foi realizada a técnica de Western 
 Blotting (WB) para o PPARα e PPARᵧ, seguindo as instruções de concentração do fabricante. 
 Como normalizador da técnica foi utilizado o anticorpo Beta-actina. Resultados: Os 
 resultados mostraram que houve uma diminuição na expressão do gene PPARα em células 
 HN13, com uma redução de 40% para o miR-9-5p (p=0,031), 30% para o miR-17-5p 
 (p=0,0,35) e 25% para o miR-21-5p (0,0,31). Para a linhagem FaDu, a expressão do PPARα
 foi reduzida após a transfecção de miR-9-5p (50%, p=0,031), seguida por miR-21-5p (25%, 
 p=0,031) e miR-17-5p (23%, p=0,093), embora, não tenha alcançado significância estatística 
 para o miR-17-5p. Pela expressão proteica, foi possível observar que os microRNAS miR-17-
 5p e miR-21-5p foi reduzida em relação ao controle negativo; enquanto o miR-9-5p a 
 expressão foi aumentada. Na linhagem HN13 houve um aumento em relação ao grupo 
 controle da expressão do PPARᵧ após transfecção de todos os miRNAs, sendo de 85% 
 (p=0,0878) com o miR-9-5p, 263% (p=0,0454) miR17-5p e 80% (p=0,0335) com o miR-21-
 5p. O mesmo foi observado na linhagem FaDu, com 80% (p=0,0374) miR-9-5p, 72% 
 (p=0,0580) miR-17-5p e 25% 9p=0,0365) com o miR-21-5p. A expressão proteica do 
 PPARα, por WB mostrou redução após a transfecção com o miR-17-5p na linhagem HN13, 
 em torno de 52 kDa. As amostras transfectadas com o miR-9-5p e miR-21-5p não 
 apresentaram redução. Conclusão: Os resultados mostram que o miR-9-5p e o miR-21-5p 
 possivelmente regulam a expressão do gene PPARα nas linhagens HN13 e FaDu. No entanto, 
 o miR-17-5p regula o PPARα apenas na linhagem HN13. Entretanto, a expressão do PPARᵧ
 não foi reduzida após a transfecção de todos os miRNAs. Isso impulsiona a importância
 destes genes relacionados aos processos metabólicos e de inflamação relacionados ao CCP.
 Por meio dos resultados, é possível compreender a importância fundamental dos 
 biomarcadores para diagnóstico, tratamento e monitoramento de doenças, como no câncer de 
 cabeça e pescoço, que envolve equipes multidisciplinares, impulsionando avanços cruciais na 
 saúde. O conhecimento deste mecanismo de regulação poderá contribuir nos cuidados à saúde 
 de pacientes com CCP.",
 	publisher = {Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Enfermagem},
 	note = {Faculdade 1::Departamento 2}
}